大肠杆菌O157选择性显色培养基(国标首选)
HiCrome™ EC O157:H7 Selective Agar Base,Modified
原理
肠出血性大肠杆菌又名为产Vero细胞毒素的大肠杆菌(VTEC/EHEC)。尽管有许多血清型大肠杆菌产Vero细胞毒素[3],但大肠杆菌O157:H7是导致人类感染的最常见的一种。它有几种不常见的生化特性可用于鉴定。它属于仅少数的beta葡萄糖醛酸酶(-),24小时内不发酵山梨醇或鼠李糖。它们可从接种到含山梨醇而非乳糖的培养基的粪便标本中分离出来。
该款显色培养基采用植物源蛋白胨,以取代动物源,避免了BSE/TSE风险。它基于 Rappaport 和Henigh[1]描述的配方而成。培养基含山梨醇和显色混合剂,不含乳糖和指示剂染料。显色剂被大肠杆菌O157:H7 特异性裂解,产生深紫至洋红色。普通大肠杆菌形成蓝绿色菌落。
培养基中的HiVeg水解物和酵母粉提供碳源、氮源营养和长链氨基酸、维生素和其他生长营养。氯化钠维持渗透压平衡。添加剂使培养基更具有选择性[2]。添加剂中的亚碲酸钾选择性抑制气单胞菌和普罗威登菌。添加剂中的新生霉素抑制革兰阳性菌。月桂基硫酸钠抑制伴随的革兰阳性菌群。
该产品用HiVeg植物蛋白成份替代了动物蛋白成份,
培养功效完全一致,且
(1)批间差异更小,
(2)增菌时由于动物蛋白造成的干扰因素更少,
(3)避免疯牛病(BSE /TSE)、口蹄疫等相关动物病毒的风险,
(4)对实验人员及实验环境更安全。
此产品完全无动物源成份
培养基成分
组成g/L
HiVeg水解物5.000
酵母粉3.000
山梨醇7.000
合成离子活性剂1号1.500
月桂基硫酸钠0.100
显色混合剂0.250
琼脂15.000
最终pH(25°C)6.8±0.2
配制
31.85g溶于990ml蒸馏水,加热至沸使完全溶解。高压灭菌后,冷却至45-50℃,无菌加入复溶的添加剂(货号:FD187,先用10ml蒸馏水复溶)。混匀并倾注平板。
质量控制
外观:奶油色至黄色均一自由粉末
成胶性: 牢固,与1.5%琼脂相当
制备好的培养基颜色和透明度:在平皿中为浅琥珀色,透明至轻微不透明凝胶
配比反应:25°C下3.18% w/v水溶液,pH值为6.8±0.2
pH值要求:6.60-7.00
培养反应
加入添加剂(货号:FD187)后,在35-37°C培养18-24小时,观察如下:
参考文献
1.Rappaport F.and Henigh E.,1952,J.Clin.Pathol.,5:361.
2.Zadik P.M.,Cahpman P.A.and Siddons C. A.,1993,J.Med.Microbiol.,39,155-158.
3.Smith and Scottland,1988,J.Med.Microbiol.,26:77-85