本文亮点
ALPPL2是一个经蛋白质组学和转录组学分析发现的特异性原始表面标记蛋白
APG报告系统敏锐地监控了原始状态的退出和建立
ALPPL2的缺失损害了原始多能性的维持和建立
ALPPL2和IGF2BP1相互作用以稳定TFCP2L1和STAT3的mRNA水平
Cell Reports编辑的导语:
Bi等人将ALPPL2鉴定为一种原始多能性特异的功能性表面标记物,它与IGF2BP1相互作用,调节STAT3和TFCP2L1的mRNA的稳定性,影响原始多能性的维持和建立,为人类原始多能性的相关机制的研究提供了有力的工具。
本文总结:
从着床前囊胚的外胚层细胞中建立的人类原始多能干细胞为多能性调节和谱系分化的机制研究提供了一个有用的模型。在细胞的原始多能性的培养条件的优化和分子标准的确定两方面已经取得了重要进展。然而,人们现在对确定原始特异性的表面标记和原始多能性调控的潜在的分子机制仍然知之甚少。
本文中研究者通过系统的蛋白质组学和转录组学分析,鉴定出碱性磷酸酶胎盘样因子2(ALPPL2)是一个主要的原始特异性表面标记物。然后研究者们又发现ALPPL2对于原始多能性的建立和维持都是必要的。ALPPL2可以与RNA结合蛋白IGF2BP1相互作用来稳定原始多能性的转录因子TFCP2L1和STAT3的mRNA水平,从而调节细胞的原始多能性。
总的来说,本研究确定了一个功能性的人类原始多能性的表面标记物,并为人类原始多能性相关的机制研究提供了强有力的工具。通过报告系统的研究方法,本文研究也为细胞状态监测、细胞亚群体的纯化、生物学事件分析和培养条件的优化提供了有力的工具。
重要研究结果:
1) 通过LC-MS/MS(液相色谱串联质谱法)分析的表面蛋白特征确定 2) ALPPL2是一种原始多能性特异性的表面标记物
3) 在转录水平确认了ALPPL2对原始多能状态的专一性
4) 通过报告系统验证了ALPPL2对原始多能态的专一性
5) 发现ALPPL2在原始多能性的维持和建立中起了重要作用
6)发现ALPPL2与IGF2BP1有相互作用来调节细胞的原始多能性
实验模型与样本:
人类着床前囊胚样本
细胞系样本
人类ESC细胞系
实验主要方法:
人类ESC的状态转换
用于iTRAQ/MASS和MASS谱分析法的膜蛋白提取
免疫染色法、流式细胞术、RT-PCR和western-blotting
透射电镜分析
RNA序列文库构建和测序
慢病毒的生成与稳定细胞系的生成
免疫沉淀IP、共沉淀coIP和RIP
量化和统计分析
分析数据和代码的可用性